多肽合成及設(shè)備

多肽的化學(xué)合成方法：

固相合成法:1963年，R.B.Merrifield創(chuàng)立了將氨基酸的C末端固定在不溶性樹脂上，然后在此樹脂上依次縮合氨基酸、延長肽鏈、合成蛋白質(zhì)的固相合成法。在固相法中，每步反應(yīng)后只需簡單地洗滌樹脂，便可達(dá)到純化目的，克服了經(jīng)典液相合成法中的每一步產(chǎn)物都需純化的困難，為自動化合成肽奠定了基礎(chǔ)。為此，Merifield獲得1984年諾貝爾化學(xué)獎。
經(jīng)過不斷發(fā)展，現(xiàn)在固相法主指Fmoc法, 以樹脂為固相載體,將保護(hù)氨基酸共價連接在固相載體上, 然后通過去掉其保護(hù)基, 再把第二個保護(hù)氨基酸接到第一個氨基酸上, 重復(fù)反應(yīng)，直至合成完所需要的肽鏈長度, 再通過相應(yīng)的裂解試劑, 把肽能樹脂上釋放出來，經(jīng)純化凍干得到精品。
優(yōu)點:用于中長肽的合成, 粗品肽純度較高
缺點：成本高，溶劑使用量大，合成規(guī)模較小

 

液相合成法:主要采用BOC和Z兩種保護(hù)方法，主要應(yīng)用在短肽合成
優(yōu)點:成本相對低,溶劑使用量小，合成規(guī)模容易放大
缺點：操作繁瑣周期長，粗品純度差
萊昂團(tuán)隊另辟蹊徑， 開發(fā)出了許多肽的連續(xù)合成的方法，其效率堪比固相合成法，又同時解決了操作繁瑣與粗品純度差的問題。

 

毫克及千克級液相固相合成反應(yīng)器（釜）

多肽純化及設(shè)備

多肽純化:

當(dāng)前化學(xué)合成多肽的純化方法，主要采用反相高效液相色譜法, 常用的流動相體系是水加乙腈或甲醇，以三氟乙酸（TFA）為離子對試劑，根據(jù)不同多肽以合適的梯度洗脫分離多肽。 多數(shù)多肽都是在TFA體系下分離純化的，所以多肽以TFA鹽的形式最多，其次藥物肽一般有醋酸鹽及鹽酸鹽的形式，極少數(shù)藥物肽會有一些特殊的鹽形式。轉(zhuǎn)鹽方式多為離子交換法和HPLC法，而脫鹽可用G25柱（安馬西亞出的一種葡聚糖凝膠柱）。

毫克及千克級反相高效液相純化設(shè)備

多肽凍干及設(shè)備

多肽凍干:多肽通過HPLC分離純化后, 通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀去掉大部分的有機(jī)溶劑與水, 然后再利用凍干機(jī)凍干多肽。
凍干多肽的保存：
保存在冰凍條件下，最好 -20℃，若保存在-10℃以下, 大多數(shù)肽可維持幾年的活性。
使用冰凍產(chǎn)品時, 開蓋之前, 瓶或試管應(yīng)在裝有新鮮干燥劑的干燥箱內(nèi)升至室溫。
對于保存于-20℃的產(chǎn)品, 這個過程需要一小時或更長, 隨包裝大小而異。
否則, 當(dāng)瓶打開時, 水氣進(jìn)入導(dǎo)致多肽凝縮而降低其穩(wěn)定性。一旦打開, 應(yīng)迅速稱量完畢, 并立即密閉以免潮解, 尤其親水肽更應(yīng)注意。

毫克及千克級抽真空低溫冷凍干燥設(shè)備

多肽應(yīng)用

多肽是涉及生物體內(nèi)各種細(xì)胞功能的生物活性物質(zhì)。自人工方法合成多肽以來．伴隨著分子生物學(xué)、生物化學(xué)技術(shù)的發(fā)展，多肽的研究取得了驚人進(jìn)展。
目前多肽的應(yīng)用主要集中在多肽藥物、多肽藥物載體、組織工程材料和多肽營養(yǎng)食品等方面。
1、抗腫瘤多肽
2、抗病毒多肽
3、多肽導(dǎo)向藥物
4、細(xì)胞因子模擬肽
5、抗菌性活性肽
6、用于心血管疾病的多肽
7、其它藥用小肽
8、診斷用多肽
9、多肽疫苗
10、多肽藥物載體
11、組織工程材料
12、多肽營養(yǎng)食品
13、化妝品多肽